CRISPR-Cas系統是一種原核適應性免疫系統,用來抵御外來遺傳組分對生命體的干擾。1類CRISPR系統(包括I、III和IV型)包含多蛋白效應復合物,而2類CRISPR系統(包括II、V和VI型)具有單一效應蛋白。CRISPR-Cas9屬于2類II型CRISPR系統,是目前使用最廣泛的基因組編輯工具,由Cas9核酸酶、負責DNA靶向的crRNA及反式激活tracrRNA組成。

CRISPR-Cas12a是另一種用于基因編輯的2類RNA引導的核酸內切酶。Cas12a核酸酶識別5’-TTTV PAM相反鏈上與crRNA間隔區互補的DNA靶序列,無需使用tracrRNA。識別后于RuvC域和Nuc域處產生交錯的DNA雙鏈斷裂。與Cas9產生平末端相比,Cas12a產生交錯末端可能更有利于以精確方向整合DNA序列等應用。CRISPR-Cas12a基因編輯系統可作為Cas9系統的極大補充,甚至在某些編輯領域中比Cas9系統更具優勢。

泓迅科技依托完備的Syno?合成平臺及豐富的專業知識和實踐經驗積累,可提供基于CRISPR-Cas12a系統的一站式解決方案,包括Cas12a(Cpf1) 核酸酶產品及定制化crRNA序列合成服務。經體外系統活性驗證,我們的Cas12a核酸酶產品及化學合成的crRNA序列可很好的發揮基因序列的切割作用。

CRISPR-Cas12a編輯系統的優勢:

a. CRISPR-Cas12a系統拓展了CRISPR-Cas9系統不可用的編輯位點,且能在序列5’端產生交錯切割。這相比CRISPR-Cas9系統,顯著增加了細胞選用同源重組修復(HR)方式的概率,提升了基因編輯效率。
b. Cas12a識別富含胸苷的PAM 序列 (YTN),能夠在具有豐富AT基因組的生物體中進行基因組編輯,比CRISPR-Cas9系統更具廣泛的序列編輯范圍。
c. 只需要crRNA與Cas12a蛋白的簡單復合而不需要tracrRNA,且CRISPR-Cas12a的crRNA較短,一般在40-44nt左右,更有利于化學合成。

CRISPR-Cas12a crRNA

目前,將As Cas12a(Cpf1)與crRNA形成的核糖核蛋白(RNP)直接轉移到細胞中的方法具有更安全、更快、脫靶效應更低、編輯效率更高等優點。已逐漸成為使用 CRISPR基因編輯技術的一種更有效的方式。

CRISPR-Cas12a與crRNA復合物

CRISPR-Cas12a與crRNA復合物

CRISPR-Cas12a crRNA 是一個單一的 40-44nt左右的引導 RNA,包含一個 20nt的恒定區和一個 20-24nt的特異性結合區域。我們通常建議使用 21nt的特異性結合區域以獲得最佳活性。crRNA識別 TTTV PAM 位點相反鏈上的21-24 個核苷酸,其中 V 是 A、C 或 G。在進行crRNA序列設計時,設計的crRNA序列中不包含PAM 序列。

服務詳情

長度(nt) 訂購規格 修飾類型 純化方式 周期(工作日) 發貨形式
40-44nt 1-10 OD 硫代
2′-OMe
Blocking
HPLC 7-10
  • 干粉RNA 1管
  • COA文件
  •  
    As Cas12a(Cpf1)核酸酶

    As Cas12a(Cpf1)核酸酶,來源于Acidaminococcus sp. BV3L6 (A.s.),由大腸桿菌系統進行表達。C末端帶有SV40 NLS和nucleoplasmin NLS兩個核定位信號。同時重組蛋白C末端還帶有TEV蛋白酶切位點以及6xHis標簽。為獲得最佳編輯效果,我們推薦將As Cas12a(Cpf1)核酸酶與Cas12a crRNA 以等摩爾量結合。

    As Cas12a(Cpf1)核酸酶

    As Cas12a(Cpf1)核酸酶產品示意圖

    產品屬性

    產品名稱 As Cas12a(Cpf1)核酸酶
    分子量 157.65KDa
    表達系統 Escherichia coli
    標簽 C-6xHis
    純度 SDS-PAGE,≥95%
    濃度 1mg/mL, 100ug蛋白約633 pmol
    內毒素 LAL, <0.1EU/ug
    儲存緩沖液 10 mM Tris, pH8.0, 300 mM NaCl, 0.5 mM TCEP, 50% glycerol
    儲存條件 -20℃、-80℃保存
    發貨規格 貨號HX-AsCas12a-1: 100ug
    貨號HX-AsCas12a-2: 0.5mg
    貨號HX-AsCas12a-3: 1mg
    運輸條件 藍冰運輸

    *注意事項:短期存儲可在-20℃保存,長期存儲可分裝并在-80℃保存,切記反復凍融,保質期1年。

    產品質檢圖
    Protein Marker&As Cas12a(Cpf1)

    Lane1: Protein Marker
    Lane2: As Cas12a(Cpf1)核酸酶, ~157.65KDa

     
    Cas12a核酸酶活性驗證:

    結果分析:目標DNA序列1kb,在Cas12a核酸酶及crRNA作用下切割目標DNA序列,可產生700bp及300bp的小片段。如圖所示,在加入3ul及1.5ul Cas12a核酸酶時,都可以表現出高效的DNA序列切割效率。

    免費申請活動詳情

    1. 活動時間:2022.09.01-2022.10.31
    2. 本次活動僅限終端客戶參與。
    3. 申請免費試用的客戶可發送產品名稱、個人信息(姓名、單位全稱、聯系方式)以及郵寄地址至marketing@synbio-tech.com郵箱或與當地銷售聯系。
    4. 免費試用產品,每個客戶僅限申領一次。
    5. 已申請試用的客戶填寫試用反饋表分享您的實驗數據、結果圖等,即可享受該產品訂購的內部折扣價!
    6. 本活動最終解釋權歸蘇州泓迅生物科技股份有限公司所有。

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