穩定細胞株構建

穩定細胞株構建是指將外源DNA克隆到具有某種抗性或者選擇基因的載體上,轉染宿主細胞后,利用載體中所含的選擇標志進行篩選,得到可穩定表達目的蛋白的細胞株。泓迅科技提供一系列穩定細胞株構建服務,用于全長抗體及抗體片段、Fc融合蛋白、多種細胞表面受體、胞質和分泌蛋白等重組蛋白/抗體的穩定及規?;a。

穩定細胞株構建實驗流程

圖1 穩定細胞株構建實驗流程

穩定細胞株服務優勢

  1. 外源基因嚴格鑒定,細胞無污染
  2. CHO1.0穩轉載體,配合嘌呤霉素+MTX篩選系統
  3. 穩定轉染及Pool篩選,周期8周左右
  4. 可對重組蛋白/抗體全長或片段進行個性化表達

服務詳情

服務項目 服務詳情 轉染方式 系統 項目周期 驗證方式 交付項目
常規過表達穩轉細胞株構建 穩定轉染及pool篩選
  • 質粒轉染
  • 慢病毒轉染
  • 293T、Hela、A549等 2-3周 Western Blot、免疫熒光(IF)驗證
  • 穩轉細胞株pool
  • 穩定轉染及單克隆篩選,篩選至少20個單克隆細胞株 5-6周
  • 1-3株穩轉細胞株
  • 表達報告
  • 抗體穩轉株構建 穩定轉染及pool篩選
  • 質粒轉染
  • CHO1.0 8周
  • 穩轉細胞株pool
  •  
    案例展示

    泓迅科技將GFP序列構建到CHO 1.0載體上,然后將構建好的GFP質粒轉化到CHO細胞中進行穩定轉染及Pool篩選,獲得GFP-CHO穩轉株,經過多輪藥物篩選后,顯微鏡下觀察熒光細胞所占比例大于90%(圖2)。
    GFP-CHO穩轉株陽性率

    圖2 GFP-CHO穩轉株陽性率

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